1.填料的选择：即凭证化合物的属性选择适合其疏散的色谱模式及牢靠相（前一章关于化合物属性中已讲到）。。。。

2.柱规格选择：生物剖析色谱柱规格的选摘要从内径和柱长两个指标来思量。。。。

差别内径的色谱柱用途：2.1mm和3.0mm内径色谱柱一样平常用于超液相色谱剖析UPLC（剖析时间短，，，效率高）；；；；4.6mm内径色谱柱一样平常用于通例液相色谱剖析HPLC；；；；10.0-300mm内径色谱柱一样平常用于制备色谱PreHPLC。。。。

差别柱长色谱柱优势：UPLC一样平常柱长为50-100mm；；；；通例HPLC和PreHPLC中，，，50-100mm柱长适用于易疏散样品，，，且剖析时间短。。。。150-300mm柱长适于难疏散或疏散度要求高的样品，，，剖析时间长。。。。柱长越长，，，其柱效越高，，，但由于装柱手艺限制，，，300mm以上长度，，，柱效会相对更低，，，因此很少有大于300mm的柱长。。。。

微观上，，，色谱柱填料的规格又包括粒径，，，孔径，，，比外貌积，，，封尾水平。。。。

粒径：色谱柱所装填料的颗粒直径。。。。下图为10μm硅胶填料在显微镜下的图片。。。。

粒径巨细一样平常有1.7μm，，，2.7μm，，，3.5μm，，，5μm，，，10μm，，，15μm，，，20μm，，，20-40μm，，，40-60μm。。。。其中1.7-3.5μm主要用于UPLC快速剖析，，，5μm填料主要用于通例HPLC，，，10μm-20μm通常用于高压制备色谱（PreHPLC），，，20-40μm和40-60μm为粒径不匀称填料，，，用于中低压制备色谱（MPLC）。。。。

粒径越小，，，柱压越高，，，疏散度及迅速度也越高。。。。

孔径：填料颗粒的外貌和内部的孔的尺寸。。。。100?，，，150?，，，200?，，，300?（更适合疏散空间结构较大的大分子化合物，，，如核苷酸，，，卵白等）。。。。

比外貌积：单位质量填料颗粒外貌和内部孔的面积之和。。。。比外貌积越大，，，与样品的接触位点越多，，，载样量越大，，，对样品的保存越强，，，柱效越高。。。。

封尾：将硅胶颗粒外貌的裸露的硅羟基用小分子硅烷键合掉。。。。

封尾降低了硅胶填料的活性，，，镌汰填料对碱性化合物形成氢键而造成的拖尾。。。。同时封尾的色谱柱比不封尾的少了氢键作用的选择性，，，因此对组分重大样品更适合选择不封尾或一次封尾的色谱柱。。。。