丁基疏水色谱柱启和装置的准确办法如下:
1.使用新鲜清洁的水与乙腈。。。冲洗系统,,,,,确保系统清洁,,,,,不含任何缓冲盐和污染物。。。
2.取用色谱柱时阻止磕碰掉落。。。
3.将丁基疏水色谱柱入口端毗连到系统上,,,,,柱出口端先不要毗连,,,,,色谱柱身上有箭头标明准确流向。。。
4.在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,,,,,然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。。。
5.当溶剂匀称的从柱出口端流出,,,,,停流速,,,,,将色谱柱出口端接到系统检测器上(这样可以阻止气泡进入检测系统,,,,,并且可快速抵达基线平衡)。。。
6.重启流速,,,,,凭证办法4的要领逐渐提高流速,,,,,至通例剖析时所使用的流速。。。
7.参考柱效测试报告中的要领,,,,,使用该流动相条件平衡色谱柱,,,,,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,,,,,直至压力与基线稳固。。。
8.测试丁基疏水色谱柱柱效。。。若是没有柱效测试报告中的剖析物,,,,,请厂家部分追求支持,,,,,使用合适的浓度与进样量。。。柱效效果略低于柱效测试报告属正常情形。。。如效果显着偏低、峰形拖尾,,,,,提醒色谱柱和/或所使用的液相系统处于非理想状态,,,,,需要举行故障排查。。。当使用2.1mm内径色谱柱时,,,,,建议优化系统以镌汰谱带展宽,,,,,包括:使用检测器微量流通池,,,,,镌汰进样器loop环体积,,,,,使用较小内径(如0.005''或0.12mm)的系统管路。。。并确保管路与丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积。。。当使用小颗粒填料(如2.5μm)短柱举行快速疏散时,,,,,需要思量以下因素:
1.确保管路丁基疏水色谱柱毗连适当、无死体积,,,,,只管优化系统镌汰谱带展宽;;
1.提高采样频率至10点/秒以上;;
3.较小粒径的色谱柱爆发的柱压较高,,,,,而较小粒径要抵达*色谱效率所需的线速率较高,,,,,请凭证所用LC系统的现真相形调理流速;;
4.可使用较高的柱温来赔偿小颗粒造成的压力升高,,,,,例如40?C。。。使用杂化颗粒反相色谱柱时,,,,,可使用45?C或更高。。。