反相色谱法以被测的高分子为牢靠相、以惰性气体为流动相，，为了测定需要，，在流动相中加入一些探针分子，，它们是挥发性的低分子。
。。将探针分子注入气化室气化后，，由载气带入色谱柱，，测定它们在两相中的分派，，从而研究高分产的种种性子，，高分子与探针分子的相互作用以及高分子与高分子间的相互作用。
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反相色谱是迄今在液相色谱中应用普遍的手艺，，主要是由于它适用于剖析极大大都的非极性物质和许多的可离子化的及离子化合物。
。。大大都用于反相色谱的牢靠相实质上都是疏水物质，，因此，，剖析物是凭证它们与牢靠相的疏水相互作用的巨细水平来疏散的，，样品基体中其它疏水杂质组分也能以同样的方法保存。
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在反相色谱法中的牢靠相是被共价连系到硅胶载体上的直往饱和烷烃，，其链的是非差别，，长的是十八烷基、这也是使用得多的牢靠相、流动相的极性比牢靠相的极性强。
。。在反相键合相色谱中，，极性大的组分先流出、性小的组分后流出。
。。一样平常说来，，牢靠相上的烷基配合基或被疏散分子中非极性部分的外貌积越大，，或者流动相外貌张力及介电常数越大，，则缔相助用越强，，保存值越大。
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反相色谱的影响因素：

 

1、溶质的分子结构（极性）

极性越弱，，疏水性越强，，k越大，，tR也越大。
。。同系物碳数越多，，极性越弱，，k越大；；；；引入极性取代基，，降低疏水性，，k值变小。
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2、牢靠相

键合烷基的疏水性随碳链的延伸而增添，，溶质的k也增大。
。。硅胶外貌键合烷基的浓度越大，，则溶质的k越大。
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3、流动相

极性越强，，洗脱能力越弱，，使溶质的k越大；；；；溶剂种类：水为弱溶剂，，醇为强溶剂；；；；溶剂比例：水的比例增添，，使k增大。
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