尺寸排阻色谱(SEC)是一种剖析手艺,,可以按尺寸并凭证从填有多孔硅胶的色谱柱中洗脱的情形来疏散已消融的大分子,,用于丈量卵白质分子量、结构、巨细及组成。。。。
当 SEC 与光散射、粘度计以及浓度检测器相连系(称为三重检测)时,,可丈量分子量、分子巨细和特征粘度,,并天生关于大分子结构、构象群集与支化方面的信息。。。。
通过使用 SEC 来丈量分子量和其他特征,,可以对卵白质、合成聚合物和多糖类之类的自然聚合物中分子举行表征。。。。
尺寸排阻色谱的特点:
1.保存时间是分子尺寸的函数,,有可能提供分子结构的某些信息。。。。
2.保存时间短,,谱峰窄,,易检测,,可接纳迅速度较低的检测器。。。。
3.牢靠相与分子间作用力极弱,,趋于零。。。。由于 ,柱子不可很强保存分子因此柱寿命长。。。。
4.不可区分分子巨细相近的化合物,,相对分子质量差别必需大于10%能得以疏散。。。。
5.大分子的流程短,,移动速率快,,先流精彩谱柱;;;;小分子的流程长,,移动速率慢,,后流精彩柱;;;;而中中分子居两者之间。。。。
6.生物相容性好,,有很高的活性接纳率。。。。
尺寸排阻色谱柱的洗濯:
多次使用后某些样品可能会吸附到入口筛板或填料上,,当积累至一定水平时会泛起压力升高并陪同峰型展宽的征象,,此时需要洗濯色谱柱。。。。一样平常流程为:断开检测器,,反接色谱柱,,在低于50%较大推荐流速下用洗濯液冲洗10-15倍柱体积。。。。