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氨基柱的反相使用办法是怎样的

更新时间:2022-01-27浏览:996次
 
  氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。。。。但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的 ,,,这一点不可忽略。。。。关于新购柱子 ,,,首先请注重翻开剖析测试说明书 ,,,相识柱子的生涯溶剂。。。。若是生涯溶剂与你将要使用的流动相极性差别不会互溶 ,,,请先用异丙醇过渡。。。。过渡历程中注重因异丙醇粘度较大 ,,,会导致柱压很高 ,,,适当调低流速。。。。若是流动相中尚有缓冲盐类 ,,,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡 ,,,阻止缓冲盐的析出。。。。
  氨基柱的反相使用办法:
  1、先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积 ,,,再依次以相同的流速相同的用量用仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)冲柱子。。。。
  2、以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注重pH值切不可凌驾11.0) ,,,连忙用水(0.5ml/min的流速 ,,,30倍柱体积)冲洗 ,,,再换成流动相。。。。
  3、配制流动相时 ,,,应各组分划分量取 ,,,比例较小的组分要细密量取 ,,,需调pH值时要细密到0.1。。。。
  4、反相条件下使用时 ,,,要特殊注重控制pH值规模 ,,,pH值越低越有爆发水解的危险 ,,,流动相中水的比例越高虽然也越有爆发水解的危险。。。。的pH规模在
  5、若是要使用的流动相中还含有缓冲盐类 ,,,建议在用剖析流动相之前 ,,,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡 ,,,这样可阻止缓冲盐在剖析柱内的析出。。。。
  6、有一种情形是 ,,,当使用氨基柱举行酸性物质的剖析时 ,,,酸性物质的保存意味着质子的保存 ,,,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化 ,,,导致使用一段时间后关于某些类的剖析物保存性子有所改变或体现在柱效下降。。。。建议:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后虽然要再用不含碱的流动相洗去多余氨) ,,,之后再举行剖析这类酸性剖析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。。。。
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