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合成寡核苷酸——包括反义寡核苷酸(ASOs)、siRNA、适配体及DNA/RNA探针等——是通过与mRNA连系来阻断翻译历程并抑制不须要的卵白质合成的短链、单链DNA/RNA分子的。 。。。。这类寡核苷酸通过固相亚磷酰胺合成法合成，， ，，在合成历程中，， ，，5'-羟基需用酸敏感型5'-二甲氧基三苯甲基（DMT）基团保�； ；；；�。 。。。。DMT既能阻止在链延伸历程中爆发副反应，， ，，又可在合成后保存以辅助纯化。 。。。。但最终产品中必需去除DMT。 。。。。
DMT在结构上具有强疏水性，， ，，这使其能够通过疏水相互作用层析法（HIC）举行纯化。 。。。。由于古板的RPC手艺疏散需要大宗使用有机溶剂，， ，，由此引发清静性、本钱和情形问题备受关注。 。。。。HIC填料可在水溶液系统举行疏散，， ，，具备替换RPC疏散的潜力。 。。。。
基于此，， ，，Z6尊龙凯时生命科学推出了高载量型HIC填料TSKgel Phenyl-3PW(20)，， ，，能够一步高效疏散DMT-on/off寡核苷酸及柱上DMT基团的剪切，， ，，实现低本钱、高效率的寡核苷酸纯化工艺。 。。。。
TSKgel Phenyl-3PW（20）产品优势：
TSKgel Phenyl-3PW(20) 是一款专为寡核苷酸、多肽等中分子量样品纯化而开发的疏水填料，， ，，表1展示了此款填料的性能参数。 。。。。
表1. TSKgel Phenyl-3PW（20）基本参数
新款填料通过优化孔径和增强疏水性，， ，，可实现对寡核苷酸的高吸附载量。 。。。。图1展示了在硫酸铵、柠檬酸盐条件下，， ，，TSKgel Phenyl-3PW(20)的吸附载量比公司原有HIC填料提升了2.5倍以上。 。。。。
图1. 对20-mer DMT-on寡核苷酸的静态吸附载量
TSKgel Phenyl-3PW（20）的疏散选择性：
图2展示了4种差别配基的TOYOPEARL疏水填料，， ，，在疏散DMT-on/off寡核苷酸时体现出的差别疏散选择性。 。。。。浚可以看出，， ，，TSKgel Phenyl-3PW(20)在4款填料中的吸附力zui强。 。。。。
图2. 四款HIC填料疏散DMT-on/off寡核苷酸的比照
DMT-on/off寡核苷酸的疏散效果：
图3展示的是使用TSKgel Phenyl-3PW(20)疏散20-mer的DMT-on寡核苷酸，， ，，网络到的组分再使用离子交流色谱柱TSKgel DNA-STAT和RPC色谱柱对其举行剖析。 。。。。DMT-on/off寡核苷酸可以很好地脱离，， ，，且RPC-HPLC的检测效果显示接纳率可达99%。 。。。。
图3. DMT-on/off寡核苷酸的疏散
一步柱上纯化和DMT剪切的要领：
图4展示的是使用TSKgel Phenyl-3PW(20)在酸性条件下举行在线剪切DMT保�； ；；；せ�，， ，，剪切后洗脱出来的DMT-off立纵然用1 M Tris（pH 9.0）举行中和。 。。。。然后用TSKgel DNA-STAT色谱柱剖析，， ，，效果显示DMT-off寡核苷酸目的物的接纳率为94%，， ，，RPC剖析效果显示未检测到DMT-on寡核苷酸。 。。。。
图4. 在线剪切纯化DMT-off寡核苷酸
总结：
合成寡核苷酸的纯化及DMT剪切对基因治疗应用至关主要，， ，，而古板工艺中DMT的剪切与去除需要分步举行，， ，，这会增添工艺时间和重漂后。 。。。。Z6尊龙凯时新推出的TSKgel Phenyl-3PW（20）疏水填料，， ，，在pH4.0条件下能够高效一步纯化及柱上DMT剪切，， ，，既坚持了寡核苷酸的完整性，， ，，简化工艺流程，， ，，又可实现寡核苷酸的大规模纯化。 。。。。
如需相识TSKgel Phenyl-3PW（20）疏水填料的更多信息，， ，，请会见产品页面：Z6尊龙凯时疏水层析填料TSKgel Phenyl-3PW(20)_色谱填料-Z6尊龙凯时
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