液相色谱柱的故障处置惩罚要领
气泡溢出:
流动相内有气泡,,,关闭泵,,,翻开泄压阀,,,翻开purg键,,,洗濯脱气,,,气泡一直从过滤器冒出,,,进入流动相,,,无论翻开purge键一再,,,都无法扫除一直爆发的气泡。。缘故原由过滤器恒久陶醉于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长滋生,,,形成菌团,,,壅闭了过滤器,,,缓冲液难以流通地通过过滤器,,,空气在泵的压力作用下经由滤器进入流动相。。处置惩罚过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,,,超声洗濯几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,,,轻轻震荡一再,,,再将过滤器用纯水洗濯一再,,,翻开泄压阀,,,翻开purge键洗濯脱气,,,如仍有气泡一直从过滤器冒出,,,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,,,如没有气泡一直从过滤器中冒出,,,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破损,,,流动相可以流通地通过过滤器。。翻开泄压阀,,,翻开泵,,,流速调至1.0~3.0ml/min,,,纯水冲洗过滤器1小时左右。。即可将过滤器洗濯清洁。。关闭泄压阀,,,纯甲醇冲洗半小时即可。。液相色谱柱的故障处置惩罚要领
柱压高:
⑴缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;
⑵样品污染沉积。。处置惩罚关于*种情形先用40~50℃的纯水,,,低速正向冲洗柱子,,,待柱压逐渐下降后,,,响应提高流速冲洗,,,柱压大幅度下降后,,,用常温纯水冲洗,,,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;关于第二种情形,,,由样品的沉积引起污染的C18柱,,,和纯水反向冲洗柱子,,,换成甲醇冲洗,,,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子,,,再用换成甲醇冲洗,,,然后用纯水冲洗,,,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。。
无指示:
⑴泵密封垫圈磨损;
⑵大宗气泡进入泵体。。处置惩罚关于*种情形,,,替换密封垫圈;关于第二种情形,,,在泵作用的同时,,,用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处资助抽出空气。。
不稳固:
缘故原由系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间夹有异物,,,使得两者不可密封。。处置惩罚事情中注重视察流动相的量,,,包管不锈钢滤器沉入储液器瓶底,,,阻止吸入空气,,,流动相要充分脱气。。如为单向阀和阀座之间夹有异物,,,拆下单向阀,,,放入盛有丙酮的烧杯用超声波洗濯。。液相色谱柱的故障处置惩罚要领
峰分叉:
⑴色谱柱被污染;
⑵柱头填料塌陷。。处置惩罚关于*种情形,,,先用纯水反向冲洗柱子,,,然后换成甲醇冲洗,,,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的是非由样品污染的情形而定),,,再换成甲醇冲洗,,,然后用纯水冲洗,,,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。。如冲洗后依然出峰不佳,,,则思量第二种情形。。关于第二种情形,,,拧开柱头,,,检查柱填料是否硬结或塌陷。。去除硬结部分(污染的填料),,,装入新填料,,,滴一滴甲醇,,,填料下陷,,,再填,,,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,,,再填平,,,滴甲醇,,,再压紧重复一再,,,直至装满填平。。柱头用甲醇冲洗清洁,,,擦净柱外壁的填料,,,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。。
重复性差:
⑴进样阀漏液;
⑵加样针不到位。。
⑶液量缺乏.
处置惩罚关于*种情形替换进样阀垫圈;关于第二种情形包管加样针插究竟,,,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,,,以包管进样量的准确。。一样平常事情中,,,液相色谱仪的保养很是主要,,,如要注重不要让空气进入输液系统和高压泵中,,,储液器内的溶液如长时间未用应洗濯储液器并替换溶液,,,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗清洁,,,避免无机盐析出或沉积;样品的前处置惩罚也很主要,,,任何样品都要尽可能地去除杂质,,,*消融,,,只管镌汰对色谱柱的污染,,,以延伸色谱柱的使用寿命,,,同时阻止注射过浓的样品溶液,,,以免残留液在进样阀内析出固体引起梗塞;色谱柱作好标记,,,用于差别剖析目的的色谱柱不要混用等。。